Fenilgalaktozid CAS: 2818-58-8

Vpliv na aktivnost encima: Fenilgalaktozid se običajno uporablja za merjenje aktivnosti encima β-galaktozidaze.Ko fenilgalaktozid hidrolizira β-galaktozidaza, sprosti p-nitrofenol.Kopičenje p-nitrofenola je mogoče kvantitativno izmeriti, kar omogoča vpogled v aktivnost β-galaktozidaze.Ta učinek se izkorišča v aplikacijah, kot so encimski testi in presejalni sistemi.

Analiza izražanja genov: Fenilgalaktozid se pogosto uporablja kot substrat v poskusih molekularne biologije za preučevanje izražanja genov.Gen lacZ, ki kodira β-galaktozidazo, je običajno spojen z regulatornimi sekvencami drugih zanimivih genov.Izražanje gena lacZ in hidroliza fenilgalaktozida z β-galaktozidazo lahko nakazujeta vzorec izražanja in raven ciljnega gena, ki se proučuje.

Sistemi presejanja: Fenilgalaktozid je pomemben sestavni del sistemov presejanja, ki uporabljajo aktivnost β-galaktozidaze.Splošno znan primer je modro-bela presejalna metoda, ki se uporablja za identifikacijo rekombinantnih ali transformiranih celic v poskusih molekularne biologije.Kolonije, ki so uspešno prevzele rekombinantno DNK ali so bile podvržene genetski rekombinaciji, bodo izražale β-galaktozidazo, kar vodi do hidrolize fenilgalaktozida in tvorbe modre barve.

Čiščenje beljakovin: V nekaterih primerih se lahko fenilgalaktozid uporablja kot ligand za afinitetno kromatografijo za čiščenje beljakovin, ki se specifično vežejo na β-galaktozidazo ali jih aktivira.Protein, ki nas zanima, ima lahko afinitetno oznako ali fuzijsko oznako, ki vsebuje domeno, ki veže β-galaktozidazo.S prehodom beljakovinske mešanice skozi kolono z imobiliziranim fenilgalaktozidom lahko želeni protein selektivno zadržimo in nato eluiramo.