Fenilgalaktozid CAS: 2818-58-8

Vpliv na aktivnost encimov: Fenilgalaktozid se pogosto uporablja za merjenje aktivnosti encima β-galaktozidaze. Ko β-galaktozidaza hidrolizira fenilgalaktozid, sprosti p-nitrofenol. Kopičenje p-nitrofenola je mogoče kvantitativno izmeriti, kar omogoča vpogled v aktivnost β-galaktozidaze. Ta učinek se izkorišča v aplikacijah, kot so encimski testi in presejalni sistemi.

Analiza izražanja genov: Fenilgalaktozid se pogosto uporablja kot substrat v molekularno-bioloških poskusih za preučevanje izražanja genov. Gen lacZ, ki kodira β-galaktozidazo, je običajno spojen z regulatornimi zaporedji drugih genov, ki nas zanimajo. Izražanje gena lacZ in hidroliza fenilgalaktozida z β-galaktozidazo lahko kažeta na vzorec izražanja in raven ciljnega gena, ki ga preučujemo.

Sistemi za presejanje: Fenilgalaktozid je pomembna komponenta sistemov za presejanje, ki uporabljajo aktivnost β-galaktozidaze. Splošno znan primer je modro-bela presejalna metoda, ki se uporablja za identifikacijo rekombinantnih ali transformiranih celic v molekularno-bioloških poskusih. Kolonije, ki so uspešno prevzele rekombinantno DNK ali so bile podvržene genetski rekombinaciji, bodo izražale β-galaktozidazo, kar bo povzročilo hidrolizo fenilgalaktozida in nastanek modre barve.

Čiščenje beljakovin: V nekaterih primerih se lahko fenilgalaktozid uporabi kot ligand za afinitetno kromatografijo za čiščenje beljakovin, ki se specifično vežejo na β-galaktozidazo ali jih ta aktivira. Zadevna beljakovina ima lahko afinitetno oznako ali fuzijsko oznako, ki vsebuje domeno, ki se veže na β-galaktozidazo. Z dajanjem beljakovinske mešanice skozi kolono z imobiliziranim fenilgalaktozidom lahko želeno beljakovino selektivno zadržimo in nato eluiramo.